NHS-Biotin 活性酯-生物素的应用 CAS：35013-72-0 亲和纯化 链霉亲和素体系 生物素桥

NHS-Biotin是一种常用的生物交联试剂，其化学名称为N-羟基琥珀酰亚胺-生物素。它是一种活性酯化合物，通过与生物分子中的氨基反应，实现与目标分子的共价交联。以下是NHS-Biotin作为生物交联试剂的主要应用：

1. 亲和纯化：NHS-Biotin可以与含有氨基的生物分子（如蛋白质、多肽、抗体等）发生交联反应，将生物分子与生物素之间形成共价结合。这样，可以利用生物素-亲和纯化的特性，将目标分子与其他非特异性的蛋白质分离开来，实现纯化和富集。

2. 免疫染色：NHS-Biotin可以作为标记物，与抗体发生交联反应。通过将生物素标记在抗体上，可以用于免疫染色和免疫组化实验中。免疫染色时，生物素标记的抗体与目标分子结合后，可以通过与酶-生物素-链霉亲和素（HRP-avidin/biotin）体系相互作用，使目标分子可见。

3. 细胞表面标记：NHS-Biotin可以与细胞表面的氨基酸残基发生交联反应，将生物素标记在细胞表面。这样，可以通过与荧光素-链霉亲和素（Streptavidin-Fluorochrome）等相互作用，用于细胞标记、细胞追踪和细胞分选。

4. 蛋白质-蛋白质交联：NHS-Biotin还可以用于蛋白质-蛋白质交联实验。通过将NHS-Biotin与两个目标蛋白质分别进行交联反应，形成一个横跨两个蛋白质的生物素桥。这样可以研究蛋白质间的相互作用、复合物的组装等。

需要注意的是，在使用NHS-Biotin进行交联反应时，应根据具体实验条件和目标分子的特性，优化反应条件，如pH、反应时间、浓度等，以获得最佳的交联效果。