Streptavidin和Avidin的区别 亲和素 链霉亲和素 抗原性 结合亲和力
Streptavidin和Avidin是两种常用的亲生物素结合蛋白质,它们在生物学研究中具有广泛的应用。尽管它们具有相似的结构和功能,但在一些方面存在一些区别。
首先,Streptavidin和Avidin的来源不同。Streptavidin是从细菌(Streptomyces avidinii)中分离得到的,而Avidin则是从鸟类蛋白质中(通常是鸟蛋白)提取得到的。这两种蛋白质都是四聚体结构,每个亚单位都能与生物素结合。
其次,Streptavidin和Avidin在结合生物素的亲和性上有所差异。Avidin的结合亲和力非常高,可以与生物素形成非常强大和稳定的结合,这使得Avidin在许多实验中被广泛使用。然而,Avidin的结合亲和力过高可能导致非特异性结合,从而干扰实验结果。Avidin的结合常数在10^14 M^-1的数量级,使其成为非常理想的生物素标记试剂。Streptavidin的结合亲和力略低于Avidin,Streptavidin的结合常数约为10^13 M^-1,但仍然足够强大,能够与生物素结合形成稳定的复合物,同时减少非特异性结合的可能性。
此外,由于Avidin是从鸟类蛋白质中提取得到的,其中可能存在着与其他生物体(如人类)产生的抗体相互作用的问题。这种抗原性可能导致在某些实验中引起免疫反应。相比之下,Streptavidin是细菌源性蛋白质,具有较低的抗原性,因此更适合用于与抗体或其他生物材料一起使用的实验。
Streptavidin是一种非糖基化蛋白,基本不带电荷,因此在中性条件下不带电荷。相比之下,Avidin的pI值为10-10.5,在中性pH条件下呈碱性,带电荷。由于Streptavidin和Avidin相比在中性条件下不带电荷,因此Streptavidin的非特异性结合比Avidin低很多,这样检测时的非特异性背景就低很多。因此,目前在生物素检测时通常使用Streptavidin替代Avidin。
最后,Streptavidin和Avidin在稳定性方面也存在一些差异。Avidin对于某些条件(如高温、酸碱性环境)敏感,可能导致其失活。而Streptavidin则相对更稳定,在更广泛的条件下保持其活性。
综上所述,在选择使用Streptavidin还是Avidin时,需要根据实验的具体需求和条件来进行考虑。