5-FITC-生物素5-FITC Biotin(CAS:134759-22-1)用于活细胞和固定细胞的荧光标记

5-FITC-生物素（5-Fluorescein Isothiocyanate Biotin）在生物学研究和实验中，常被用作活细胞和固定细胞的荧光标记。

一、荧光标记原理

5-FITC-生物素结合了荧光素（FITC）和生物素（Biotin）的特性。其中，荧光素（FITC）部分提供绿色荧光，当受到特定波长的光激发时，能够在最大发射波长处发出黄绿色的荧光。这使得5-FITC-生物素成为一种有效的荧光标记物。生物素部分则具有高亲和力，能够与链霉亲和素（Streptavidin）或亲和素（Avidin）特异性结合，这种结合通常用于进一步的生物分子识别和检测。

二、标记步骤

细胞准备：

对于活细胞，需要确保细胞处于良好的生长状态，并在标记前进行适当的处理，如洗涤、固定等（对于固定细胞，则已经完成了固定步骤）。

标记溶液配制：

将5-FITC-生物素溶解于适当的溶剂中，如PBS（磷酸盐缓冲液）或其他细胞兼容的缓冲液，以制备标记溶液。

细胞标记：

将标记溶液加入到含有细胞的容器中，确保溶液与细胞充分接触。

在适当的温度和时间条件下进行孵育，使5-FITC-生物素能够结合到细胞表面的目标分子上。

洗涤与观察：

孵育结束后，用适当的缓冲液洗涤细胞，以去除未结合的5-FITC-生物素。

使用荧光显微镜或流式细胞仪等设备观察细胞的荧光信号，从而实现对细胞的标记和检测。

三、标记特点

高灵敏度：

5-FITC-生物素具有较高的荧光量子产率，能够提供强烈的荧光信号，使得标记结果更加清晰和准确。

高特异性：

生物素与链霉亲和素或亲和素之间的结合具有高特异性，能够确保标记的准确性。

细胞兼容性：

5-FITC-生物素对活细胞和固定细胞均具有良好的兼容性，不会对细胞的生长和活性产生显著影响。

易于操作：

标记步骤相对简单，不需要复杂的设备和操作技巧，使得5-FITC-生物素成为一种易于使用的荧光标记物。

四、应用领域

5-FITC-生物素在生物学研究和实验中具有广泛的应用领域，包括但不限于：

细胞生物学：

用于研究细胞的结构和功能，如细胞膜、细胞质、细胞核等部分的标记和观察。

免疫学：

用于检测细胞表面的抗原和抗体，以及细胞间的相互作用和信号传导。

药物研发：

用于评估药物对细胞的影响，如药物的吸收、分布、代谢和排泄等过程的研究。

毒理学：

用于研究化学物质对细胞的毒性作用，以及细胞对化学物质的反应和适应性变化。

5-FITC-生物素作为一种有效的荧光标记物，在生物学研究和实验中发挥着重要作用。其高灵敏度、高特异性和易于操作的特点，使得它成为细胞标记和检测的优选工具。